Ciencias de la Naturales

Artculo de investigacin

 

Efecto inhibitorio in vitro del aceite esencial de eucalipto (eucalyptus globulus labill.) y cscara de naranja (citrus sinensis linn. osbeck.) sobre fusarium spp . En Puno

 

In vitro inhibitory effect of essential oil of eucalyptus (eucalyptus globulus labill.) and orange peel (citrus sinensis linn. Osbeck.) On fusarium spp. In Puno

 

Efeito inibitrio in vitro do leo essencial de eucalipto (eucalyptus globulus labill.) E casca de laranja (citrus sinensis linn. Osbeck.) Sobre fusarium spp. Em

Puno

 

Victor Lanza Peralta-Peralta I 
agente1700@hotmail.edu.pe
https://orcid.org/0000-0001-5205-5255
Silverio Apaza-Apaza II
sapaza44@hotmail.com
https://orcid.org/0000-0003-1279-9342
Elisban Uriel Huanca-Quiroz III
elisbanhuanca@unap.edu.pe
https://orcid.org/0000-0003-0814-0035
Ren Aguilar-Anccota IV
raanccota@hotmail.com
https://orcid.org/0000-0002-3965-6096
 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 


Correspondencia: agente1700@hotmail.edu.pe

 

*Recibido: 20 de diciembre de 2020 *Aceptado: 12 de enero de 2021 * Publicado: 08 de febrero del 2021

       I.            Ingeniero Agrnomo, Facultad de Ciencias Agrarias de la Universidad Nacional del Altiplano, Per.

    II.            Docente Principal de la Facultad de Ciencias Agrarias de la Universidad Nacional del Altiplano, Doctoris Scientiae en Ciencia, Tecnologa y Medio Ambiente, Per.

III.            Docente Principal de la Facultad de Ciencias Agrarias de la Universidad Nacional del Altiplano, Magister Scientiae en Ingeniera Agrcola, Per.

IV.            Docente Asociado de la Facultad de Agronoma de la Universidad Nacional de Piura, Magster Scientiae en Fitopatologa, Per.

 

Resumen

El trabajo se realiz en el Laboratorio de Fitopatologa de la Escuela Profesional de Ingeniera Agronmica de la Universidad Nacional del Altiplano, ya que el fitopatgeno del Genero Fusarium spp., causa serias prdidas en tubrculos de papa (Solanum tuberosum L.) almacenados. El objetivo fue evaluar el efecto inhibitorio in vitro del aceite esencial de eucalipto (Eucalyptus globulus Labill.) y cscara de naranja (Citrus sinensis (Linn.) Osbeck.) sobre Fusarium spp. Se consider dos fases, la fase de laboratorio donde se aisl, purifico, multiplico e identifico al fitopatgeno y la fase experimental donde se obtuvieron los aceites vegetales, preparacin del medio de cultivo (PDA+aceite esencial) y medicin del crecimiento de la colonia. Para evaluar el efecto de los aceites esenciales de hojas de eucalipto y cscara de naranja sobre Fusarium spp a tres concentraciones cada uno y la combinacin de ambos aceites esenciales se utiliz el Diseo Completamente al Azar bajo un arreglo factorial de 3*3 (3 concentraciones de aceites esenciales de hojas de eucalipto E1, E2, y E3), (3 concentraciones de aceites esenciales de cscara de naranja C1, C2 y C3), con nueve tratamientos y cuatro repeticiones. Donde los tratamientos constituyeron las combinaciones de los factores en estudio. Concluyndose que a los siete das de evaluacin el tratamiento E3= (Eucalipto al 50%) tuvo menor crecimiento de la colonia de Fusarium spp., con 43.7 mm. promedio del rea radial de la placa Petri y el tratamiento C1= (Cscara de naranja al 0%) tuvo un crecimiento menor de la colonia de Fusarium spp., con 58.4 mm en promedio del rea radial de la placa Petri, respecto a las combinaciones de eucalipto ms cscara de naranja a los siete das de evaluacin el tratamiento E3C1= (Eucalipto al 50% + Cscara de naranja al 0%) posee menor crecimiento de la colonia de Fusarium spp., con un promedio del 28.8 mm., del rea radial de la placa Petri, en consecuencia, los tratamientos E3 y E3C1 tuvieron el mejor control sobre el hongo fitopatogno Fusarium spp., a los siete das de evaluacin.

Palabras clave: Aceite esencial; hongo fitopatgeno; inhibicin e in vitro.

 

Abstract

The work was carried out in the Phytopathology Laboratory of the Professional School of Agronomic Engineering of the National University of the Altiplano, since the phytopathogen of the Genus Fusarium spp., Causes serious losses in stored potato tubers (Solanum tuberosum L.). The objective was to evaluate the inhibitory effect in vitro of the essential oil of eucalyptus (Eucalyptus globulus Labill.) And orange peel (Citrus sinensis (Linn.) Osbeck.) On Fusarium spp. Two phases were considered, the laboratory phase where the phytopathogen was isolated, purified, multiplied and identified and the experimental phase where the vegetable oils were obtained, preparation of the culture medium (PDA + essential oil) and measurement of the growth of the colony. To evaluate the effect of the essential oils of eucalyptus leaves and orange peel on Fusarium spp at three concentrations each and the combination of both essential oils, the Completely Random Design was used under a factorial arrangement of 3 * 3 (3 concentrations of Eucalyptus leaves essential oils E1, E2, and E3), (3 concentrations of essential oils of orange peel C1, C2 and C3), with nine treatments and four repetitions. Where the treatments constituted the combinations of the factors under study. Concluding that at seven days of evaluation the treatment E3 = (Eucalyptus 50%) had lower growth of the Fusarium spp. Colony, with 43.7 mm. average radial area of the Petri dish and treatment C1 = (0% orange peel) had a lower growth of the Fusarium spp. colony, with 58.4 mm on average of the radial area of the Petri dish, with respect to the combinations of eucalyptus plus orange peel at seven days of evaluation treatment E3C1 = (50% Eucalyptus + 0% orange peel) has lower growth of the Fusarium spp. colony, with an average of 28.8 mm., of the area radially from the Petri dish, consequently, treatments E3 and E3C1 had the best control over the phytopathogenic fungus Fusarium spp., at seven days of evaluation.

Keywords: Essential oil; phytopathogenic fungus; inhibition and in vitro.

 

Resumo

O trabalho foi realizado no Laboratrio de Fitopatologia da Escola Profissional de Engenharia Agronmica da Universidade Nacional do Altiplano, visto que o fitopatgeno do Gnero Fusarium spp., Provoca srias perdas em tubrculos de batata armazenados (Solanum tuberosum L.). O objetivo foi avaliar o efeito inibitrio in vitro do leo essencial de eucalipto (Eucalyptus globulus Labill.) E casca de laranja (Citrus sinensis (Linn.) Osbeck.) Sobre Fusarium spp. Foram consideradas duas fases, a fase laboratorial onde o fitopatgeno foi isolado, purificado, multiplicado e identificado e a fase experimental onde foram obtidos os leos vegetais, preparo do meio de cultura (PDA + leo essencial) e medio do crescimento da colnia. Para avaliar o efeito dos leos essenciais de folhas de eucalipto e casca de laranja sobre Fusarium spp em trs concentraes cada e a combinao de ambos os leos essenciais, o Delineamento Completamente Aleatrio foi utilizado sob um arranjo fatorial de 3 * 3 (3 concentraes de leos essenciais de folhas de eucalipto E1, E2 e E3), (3 concentraes de leos essenciais de casca de laranja C1, C2 e C3), com nove tratamentos e quatro repeties. Onde os tratamentos constituram as combinaes dos fatores em estudo. Concluindo que aos sete dias de avaliao o tratamento E3 = (Eucalyptus 50%) apresentou menor crescimento da Colnia de Fusarium spp., Com 43,7 mm. mdia da rea radial da placa de Petri e o tratamento C1 = (0% casca de laranja) tiveram menor crescimento da colnia de Fusarium spp., com 58,4 mm em mdia da rea radial da placa de Petri, com em relao s combinaes de eucalipto mais casca de laranja aos sete dias de avaliao, o tratamento E3C1 = (50% Eucalyptus + 0% casca de laranja) apresenta menor crescimento da colnia de Fusarium spp., com mdia de 28,8 mm., da rea radialmente a partir de na placa de Petri, conseqentemente, os tratamentos E3 e E3C1 tiveram o melhor controle sobre o fungo fitopatognico Fusarium spp., aos sete dias de avaliao.

Palavras-chave: leo essencial; fungo fitopatognico; inibio e in vitro.

 

Introduccin

Se ha comprobado que los plaguicidas qumicos, y en particular los fungicidas, pueden tener impactos negativos en la biodiversidad de los agroecosistemas, as como en la salud pblica.

Por esta razn los cientficos trabajan en el desarrollo de alternativas de control ecolgicas (Zavaleta, 2000). Una de las ms recientes es el uso de productos derivados de las plantas (Dixon, 2001).

El descubrimiento de nuevos anti fngicos se basa en la exploracin de diferentes fuentes de compuestos biactivos, entre las que se encuentran las especies de plantas, conocidas hasta el momento entre 250.000 y 500.000 (Vepoorte, 1998; Cowann, 1999). Las plantas sintetizan metabolitos secundarios como las fitoanticipinas y las fitoalexinas, que utilizan para defenderse de la infeccin por agentes fitopatgenos, entre ellos los hongos (Farnsworth et al., 1985; Taylor, 1998; Osbourn, 1999). Otras molculas producidas por las plantas son las fitodefensinas, de naturaleza peptdica y ricas en cistena, con capacidad de inhibir el crecimiento de los hongos al producir en ellos cambios morfolgicos y dao en algunas estructuras celulares (De Lucca, 1999; Selitrenniko, 2001). Por esta razn, dichas molculas pueden ser candidatas para estudios in vitro contra agentes micticos implicados en infecciones humanas y tambin sobre hongos fitopatgenos que atacan a las plantas (Taylor, 1998; Mesa et al., 2004; Agrios, 2008).

Una amplia variedad de hongos filamentosos de los Gneros: Fusarium, Aspergillus, Phyphthora y Botrytis conocidos como fitopatgenos son de importancia comercial debido a los daos que estos causan en diferentes cultivos (Ramezani et al., 2002; Alitonou et al., 2004; Batish et al., 2008). Estos se manifiestan en su real dimensin cuando el manejo agronmico despus de la cosecha es incorrecto, as como el mal almacenamiento de las semillas y otros productos no es lo ideal, constituyndose como factor decisivo para la presencia de estos hongos filamentosos patgenos, mermando en porcentajes considerables la produccin.

Barriga (1997) en su trabajo de investigacin denominado Enfermedades fungosas en tubrculossemillas de papa almacenadas, realizado en los almacenes de papa del Centro Experimental Tahuaco INIAA-Puno, llego a identificar las enfermedades fungosas presentes en estos almacenes y los respectivos porcentajes de incidencia tal como se puede apreciar a continuacin:

 

Tabla 1: Enfermedades fungosas presentes en los almacenes de Tahuaco-INIAA-Puno.

Enfermedad fungosa

Agente causal

Porcentaje de incidencia

Pudricin seca

Fusarium spp.

4.20

Rhizoctoniasis

Rhizoctonia solani

2.48

Gangrena

Phoma sp.

1.28

Punteado negro

Colletotrichum sp.

0.80

Kasahui

Ulocladium sp.

0.32

Fuente:Barriga ,1997.

 

Muchas especies de Fusarium ocasionan marchitamientos en varias plantas. Los sntomas de la enfermedad que provocan se manifiestan en epinastia, obstruccin y empardecimiento de los vasos xilmicos, necrosis, marchitamiento y finalmente, en la muerte de la planta (Agrios, 2008). Se ha identificado como fitoparsito de ms de 100 especies de plantas entre gimnospermas y angiospermas a Fusarium oxysporum (Garces et al., 2001).

De las plantas del gnero Eucalyptus se obtienen varios aceites esenciales, extractos e infusiones con actividad antimictica, compuesto principalmente por el componente activo 1,8-cineol que se encuentra en un rango de concentracin entre 54% y 95% (Mellado et al., 1998).

 

Muchas especies de este gnero, entre las que se incluyen Eucalyptus camandulensis, Eucalyptus citriodora, Eucalyptus globulus, Eucalyptus tereticornis y Eucalyptus robusta, entre otras, han mostrado efectos contra una amplia variedad de hongos filamentosos de los gneros Fusarium, Aspergillus, Phyphthora y Botrytis conocidos como fitopatgenos en diferentes cultivos de importancia comercial (Ramezani et al., 2002; Alitonou et al., 2004; Batish et al., 2008).

Adems, el aceite esencial de naranja (Citrus sinensis) especialmente el que se obtiene de la cscara, presenta un alto contenido de monoterpenos representados en gran mayora por el limoneno (sustancia natural que se extrae del aceite de las cscaras de los ctricos y que da olor caracterstico a las naranjas y los limones), y otros monoterpenos oxigenados como linalol y cineol que se encuentran en menor proporcin. La mezcla de componentes de este aceite esencial ha demostrado actividad inhibitoria de crecimiento en diferentes cepas de hongos entre los que se encuentran algunas especies del gnero Aspergillus y Penicillium como Aspergillus niger, Aspergillus flavus, Penicillium verrucosum, Penicillium chrysogenum, Penicillium digitatum y Penicillium itacum, hongos que se encuentran asociados con el deterioro de alimentos y productos de poscosecha (Caccioni et al., 1998; Ruiz et al., 2002; Martos et al., 2006).

Los objetivos propuestos para el presente trabajo de investigacin son los siguientes:

 

Objetivo general:

Evaluar el efecto inhibitorio in vitro del aceite esencial de eucalipto (Eucalyptus globulus Labill.) y cscara de naranja (Citrus sinensis (Linn.) Osbeck.) sobre Fusarium spp.

 

Objetivos especficos:

a) Determinar la mejor dosis del aceite esencial de eucalipto in vitro (Eucalyptus globulus Labill.) y el aceite esencial de la cscara de naranja (Citrus sinensis (Linn.) Osbeck.) que impida el crecimiento del hongo fitopatgeno Fusarium spp.

b) Considerar la mejor dosis de las combinaciones del aceite esencial de eucalipto in vitro (Eucalyptus globulus Labill.) ms el aceite esencial de la cscara de naranja (Citrus sinensis (Linn.) Osbeck.) que inhiba el crecimiento del hongo fitopatgeno Fusarium spp.

 

 

Materiales Y mtodos.

Metodologa

En el desarrollo del presente trabajo se consideraron dos fases las mismas que se detallan a continuacin.

Fase de laboratorio

Siembra

Las muestras de papa con incidencia de Fusarium spp., fueron previamente lavadas con abundante agua corriente y desinfectadas con hipoclorito de sodio al 2% durante 10 minutos, con el propsito de eliminar microorganismos superficiales. Dentro de la cmara de siembra, los tubrculos fueron enjuagados con agua destilada estril y para su secado se colocaron sobre papel toalla. De cada tubrculo se cortaron porciones pequeas con sntomas aparentes (aproximadamente 1 x 0.5 cm), los cuales fueron sembrados en placas Petri conteniendo el medio Papa Dextrosa Agar con Oxitetraciclina (PDAO). Luego las placas sembradas fueron incubadas durante 7 das a 25 C, para favorecer el desarrollo y fructificacin de Fusarium spp., las placas fueron colocadas sobre una mesa con iluminacin artificial y a temperatura ambiente durante dos semanas, una vez obtenido el crecimiento del fitopatgeno se procedi a la purificacin del mismo (Agrios, 2008).

 

Purificacin de colonias

De los aislamientos obtenidos, se realizaron repiques a otras placas Petri con PDAO, hasta obtener el cultivo puro del hongo fitopatgeno (Fusarium spp).

 

Identificacin

Obtenido el crecimiento de las colonias respectivas, se procedi a preparar montajes para su observacin a travs del microscopio compuesto con la finalidad de caracterizar las estructuras morfolgicas y de reproduccin del fitopatgeno. El hongo fitopatgeno fue identificado haciendo uso de claves propuestos por Barrn (1968) y Barnett and Hunter (1998).

 

 

 

Fase experimental

 

Obtencin del aceite esencial

Los aceites esenciales se obtuvieron de las hojas de eucalipto y de la cscara de naranja, las cuales fueron recolectadas en cantidades suficientes para la ejecucin del presente trabajo de investigacin. Siguiendo el mtodo qumico destilacin por arrastre con vapor, propuesto por (Orgnica, 2011).

En el cuadro 2, se muestra las dosis propuestas de los aceites esenciales de eucalipto y cscara de naranja para su evaluacin como sustancias antifngicas frente a Fusarium spp.

 

Cuadro 1: Aceites esenciales vegetales a ser empleados para el control del hongo fitopatgeno (Fusarium spp.).

NOMBRE COMUN

NOMBRE CIENTIFICO

DOSIS

CONTROL

BAJA

ALTA

Eucalipto

Eucalyptus globulus Labill.

0%

30%

50 %

Cscara de naranja

Citrus sinensis (Linn.) Osbeck.

0 %

30%

50 %

Prueba y evaluacin de los aceites esenciales in vitro

En esta prueba se evaluaron el comportamiento de los dos aceites esenciales (Eucalipto y naranja). Para el efecto cada aceite esencial por separado se mezcl con el medio de cultivo (PDA) en un matraz de acuerdo a las concentraciones propuestas, luego se procedi al plaqueado. Seguidamente sobre este medio de cultivo (PDA+aceite esencial) ya plaqueado, se coloc un disco de aproximadamente 5 mm. de tamao extrado con el sacabocados conteniendo el fitopatgeno en estudio (Fusarium spp.), hecho todo esto las placas Petri fueron incubados en estufa a 25C, durante dos das, a partir de all se procedi a evaluar el crecimiento micelial del hongo fitopatgeno en estudio, en milmetro/da con una regla estandarizada en milmetros el dimetro de crecimiento de las colonias de Fusarium spp., evaluacin que culmin cuando el testigo (placa Petri con PDA sin aceite vegetal+Fusarium spp.) haya cubierto toda la superficie de la placa Petri (9 cm.) (Agrios, 2008).

Para evaluar el comportamiento de las combinaciones propuestas de los aceites vegetales esenciales de eucalipto y cscara de naranja se realiz de la misma forma que el caso anterior (lneas arriba) es decir se prepararon las concentraciones propuestas de ambos aceites por separado luego fueron mesclados para ser introducidos en un matraz con el PDA, procedindose luego al plaqueado y colocando sobre la placa Petri plaqueada un disco de aproximadamente 5 mm de tamao conteniendo el fitopatgeno en estudio llevado luego a la estufa a 25C por dos das para luego iniciar con la evaluacin del crecimiento micelial del hongo en estudio (Fusarium spp.) con ayuda de una regla estandarizada en milmetros, culminando esta evaluacin cuando el testigo haya cubierto toda la superficie de la placa Petri (9cm).

Anlisis estadstico

Variables en estudio

Variable independiente

a. Aceite esencial de hojas de eucalipto (E) a una concentracin de: 0%, 30% y 50% y aceite esencial de cscara de naranja (C) a una concentracin de: 0%, 30% y 50%.

b. Combinacin del aceite esencial de hojas de eucalipto (E) ms aceite esencial de cscara de naranja a las concentraciones propuestas de (E) y (C).

 

Variable dependiente

Crecimiento radial en mm/da del fitopatgeno (Fusarium spp.) sobre placas Petri conteniendo (PDA ms aceite esencial de eucalipto y PDA ms aceite esencial de cscara de naranja), as como tambin las evaluaciones del crecimiento radial en mm/da del fitopatogeno (Fusarium spp.) combinaciones de ambos aceites vegetales sobre.

 

Tratamientos

Hojas de eucalipto

Cscara de naranja

Tratamientos (Eucalipto + Cscara de naranja)

E1

C1

E1C1

C2

E1C2

C3

E1C3

E2

C1

E2C1

C2

E2C2

C3

E2C3

E3

C1

E3C1

C2

E3C2

C3

E3C3

Cuadro 2. Tratamientos en estudio

 

 

 

 

 

 

Concentraciones en estudio

Cuadro 3. Factor en estudio.

Planta utilizada

Clave

Concentraciones

Hojas eucalipto

E1

0%

E2

30%

E3

50%

Cscaras de naranja

C1

0%

C2

30%

C3

50%

 

Diseo experimental

Para evaluar el efecto inhibitorio de los aceites esenciales de hojas de eucalipto y cscara de naranja sobre Fusarium spp a tres concentraciones cada uno y la combinacin de ambos aceites esenciales se utiliz el Diseo Completamente al Azar bajo un arreglo factorial de 3*3 (3 concentraciones de aceites esenciales de hojas de eucalipto E1, E2, y E3), (3 concentraciones de aceites esenciales de cscara de naranja C1, C2 y C3), con nueve tratamientos y cuatro repeticiones haciendo un total de 36 unidades experimentales. Donde los tratamientos constituyeron las combinaciones de los niveles de factores.

El Diseo Experimental propuesto se aplic en un solo momento cuando Fusarium spp. como testigo abarco el dimetro completo de la caja Petri (9 cm.).

 

Resultados y discusin.

Crecimiento radial (mm)/da del fitopatgeno (Fusarium spp.).

En el anlisis de varianza realizado (tabla 2) para la ltima evaluacin (da 7), se ha encontrado diferencias estadsticas altamente significativas para los factores en estudio (cuadro 3), donde el factor E (aceite esencial de eucalipto) y el factor C (aceite esencial de cscara de naranja) tuvieron efectos en el crecimiento del hongo fitopatgeno Fusarium spp., es decir que las dosis de cada factor tuvieron un efecto en el desarrollo del hongo. Tambin se ha obtenido diferencias altamente significativas para la interaccin E x C, lo cual indica que los factores en estudio actan de forma dependiente sobre el crecimiento y desarrollo del hongo fitopatgeno Fusarium spp.

Por otro lado, el coeficiente de variabilidad (CV) fue de 1.39 %, valor que nos indica la confiabilidad de los datos logrados en el presente trabajo.

 

Tabla 2: Anlisis de varianza para crecimiento radial (mm) del fitopatgeno (Fusarium spp.). al 7mo da de evaluacin.

Fuente de variacin

Grados de libertad

Suma de cuadrados

Cuadrado medio

F calculada

Pr > F

Dosis de aceite esencia de eucalipto (E)

2

10566.50000

5283.25000

7222.67

<.0001

Dosis de aceite esencia de cscara de naranja (C)

2

276.50000

138.25000

189.00

<.0001

E x C

4

1618.00000

404.50000

552.99

<.0001

Error

27

19.75000

0.73148

 

 

Total correcto

35

12480.75000

 

 

 

CV=1.39%.

 

La tabla 3, muestra que la dosis E1 (Eucalipto al 0%) no tuvo mayor efecto en el crecimiento del hongo fitopatgeno con promedio de 84.7 mm. en rea radial de la placa Petri, el cual es estadsticamente superior a las dems dosis de eucalipto. Por ltimo, se ubica la dosis al E3 (50% de eucalipto), el cual si tuvo un efecto en inhibir el crecimiento del hongo fitopatgeno alcanzando un promedio de 43.7 mm. en rea radial de la placa Petri, por tanto, mayor control sobre Fusarium spp.

 

Tabla 3: Prueba de Duncan al 0.01 para factor E (aceite esencial de Eucalipto) sobre el crecimiento radial del fitopatgeno (Fusarium spp.). al 7mo da de evaluacin.

Orden de mrito

Clave

Dosis de aceite esencial de eucalipto

Crecimiento radial (mm)

Sig. 0.01

1

E1

00%

84.7

a

2

E2

30%

56.4

b

3

E3

50%

43.7

c

 

La tabla 4, muestra que la dosis C3 (Cscara de naranja al 50%) no tuvo mayor efecto en crecimiento del hongo fitopatgeno con 65.2 mm promedio en rea radial de la placa Petri, el cual es estadsticamente superior a las dems dosis de aceite esencial de cscara de naranja. Por ltimo, se ubica la dosis C1 (cscara de naranja al 0%), el cual si tuvo un efecto en inhibir el crecimiento del hongo fitopatgeno alcanzando un promedio de 58.4 mm en promedio del rea radial de la placa Petri, por tanto, mayor control sobre Fusarium spp.

 

Tabla 4: Prueba de Duncan al 0.01 para factor C (aceite esencial de cscara de naranja) sobre el crecimiento radial del fitopatgeno (Fusarium spp.). al 7mo da de evaluacin.

 

La tabla 5, nos muestra que el tratamiento E1C1 (Eucalipto al 0% ms cscara de naranja al 0%) tuvo mayor efecto en crecimiento con un promedio del 89.8 mm en rea radial de la placa Petri, el cual es estadsticamente superior a los dems tratamientos en estudio, siguindole el tratamiento E1C2 (Eucalipto al 0% ms cscara de naranja al 30%) con un promedio del 85.0 mm, el tratamiento E1C3 (Eucalipto al 0% ms cscara de naranja al 50%) con un promedio del 79.3 mm en crecimiento en rea radial de la placa Petri. Por ltimo, se ubica el tratamiento E3C1 (Eucalipto al 50% ms cscara de naranja 0%), el cual si tuvo un efecto en la inhibicin del crecimiento del fitoptogeno alcanzando solo un promedio del 28.8 mm en rea radial de la placa Petri.

 

Orden de mrito

Clave

Dosis de aceite esencial de cscara de naranja

Crecimiento radial (mm)

Sig. 0.01

1

C3

50%

65.2

a

2

C2

30%

61.2

b

3

C1

00%

58.4

c

Tabla 5: Prueba de Duncan al 0.01 para la interaccin E x C sobre el crecimiento radial del fitopatgeno (Fusarium spp.). al 7mo da de evaluacin.

Orden de mrito

Clave

Dosis de aceite esencial de Eucalipto x Dosis de aceite esencial de cscara de naranja

Crecimiento radial (mm)

Sig. 0.01

1

E1C1

00% x 00%

89.8

a

2

E1C2

00% x 30%

85.0

b

3

E1C3

00% x 50%

79.3

c

4

E2C3

30% x 50%

59.5

d

 

 

 

 

 

 

 

En el grfico 1, se observa que los tratamientos en estudio tienen un efecto significativo en el crecimiento del hongo fitopatgeno Fusarium spp., en forma ascendente a partir del primer da hasta el cuarto

5

E3C3

50% x 50%

56.8

e

6

E2C1

30% x 00%

56.8

e

7

E2C2

30% x 30%

53.0

f

8

E3C2

50% x 30%

45.5

g

9

E3C1

50% x 00%

28.8

h

da, a partir de ello los tratamientos tienen un crecimiento casi regular. Adems, se observa en el grfico 1 que el testigo alcanzo su mximo crecimiento a los 7 das, cubriendo el radio de la placa Petri (90 mm 9cm) por completo.

El tratamiento que ha destacado en la inhibicin de crecimiento del hongo fue el E3C1 (combinacin de 50% de eucalipto ms 0% de cscara de naranja), en el cual el crecimiento de la colonia fue quedndose a partir del da cuatro, al da siete habiendo alcanzado un radio promedio de 28.8 mm., seguido del tratamiento E3C2 (50% de eucalipto ms 30% de cscara de naranja), que alcanz un promedio de 45.5 mm de radio.

 


Grfico 1: Crecimiento radial (mm/da) de Fusarium spp. Durante 7 das de evaluacin.

Los resultados logrados en el presente trabajo son abalados por (Harbone, 1998), quien seala que dentro de los metabolitos secundarios con actividad fungicida se encuentran los provenientes de la fraccin lquida voltil que contiene las sustancias responsables del aroma de las plantas o aceites esenciales.

Estos resultados logrados probablemente se deban porque los aceites esenciales son conocidos por ejercer actividad antimicrobiana (Chaibi et al., 1997) (Murillo et al., 2002) (Ramezani et al., 2002) (Mesa et al., 2004) (Sacchetti et al., 2005) (Senhaji et al., 2005) (Schelz et al., 2006) (Inouye et al., 2006) (Barreto et al., 2006). Aunque el mecanismo por el cual actan no est totalmente entendido, puede involucrarce en este la destruccin de la membrana microbiana por lo constituyentes lipofilicos que poseen (Schelz et al., 2006) (Keeler, 1991) y estudios recientes reportan otros efectos como cambios en la morfologa del hongo que incluyen daos sobre estructuras como conidias, macroconidias e hifas, as como la disminucin en la produccin de micotoxinas (Park et al., 2009).

As como tambin en las plantas del genero Eucalyptus se obtiene varios aceites esenciales, extractos e infusiones con actividad antimictica, compuestos principalmente por el componente activo 1,8-cineol que se encuentra en un rango de concentracin entre el 54 % y 95% (Mellado et al., 1998), muchas especies de este gnero, entre las que se incluyen E. camandulensis, E. citriodora, E. globulus, E. tereticornis, E. robusta, entre otras, han demostrado efectos contra una amplia variedad de hongos filamentosos de los gneros Fusarium, Aspergillus, Phyphthora y Botrytis conocidos como fitopatgenos en diferentes cultivos de importancia comercial (Ramezani et al., 2002) Alitonou Fusarium oxysporum Schlechtend. F. sp. lycopersici Sacc. (Snyder y Hansen, 2004) (Batish et al., 2008), adems, el aceite esencial de naranja (Citrus sinensis) especialmente el que se obtiene de la cscara, presenta un alto contenido de monoterpenos representados en gran mayora por el limonero y otros monoterpenos oxigenados como el linalol y cineol que se encuentran en menor proporcin. La mezcla de componentes de este aceite esencial ha demostrado actividad inhibitoria de crecimiento en diferentes cepas de hongos entro los que se encuentran algunas especies del genero Aspergillus y Penicillium como A. niger, a. Flavus, P. verrucosum, P. digitatum y P. italicum, hongos que se encuentran asociados con el deterioro de alimentos y productos de poscosecha (Caccioni et al., 1998) (Ruiz et al., 2002) (Martos et al., 2006).



Conclusiones

A los siete das de evaluacin el tratamiento E3= (Eucalipto al 50%) tuvo menor crecimiento de la colonia de Fusarium spp., con 43.7 mm. promedio del rea radial de la placa Petri y el tratamiento C1= (Cscara de naranja al 0%) tuvo un crecimiento menor de la colonia de Fusarium spp., con 58.4 mm en promedio del rea radial de la placa Petri, A los siete das de evaluacin el tratamiento E3= (Eucalipto al 50%) posee menor crecimiento de la colonia del hongo fitopatgeno Fusarium spp., con 43.7 mm. promedio del rea radial de la placa Petri y el tratamiento C1= (Cscara de naranja al 0%) tuvo un crecimiento menor de la colonia de Fusarium spp., con 58.4 mm en promedio del rea radial de la placa Petri.

A los siete das de evaluacin de las combinaciones de eucalipto ms cscara de naranja el tratamiento E3C1= (Eucalipto al 50% + Cscara de naranja al 0%) posee menor crecimiento de la colonia de Fusarium spp., con un promedio del 28.8 mm., del rea radial de la placa Petri, en consecuencia, los tratamientos E3 y E3C1 tuvieron el mejor control sobre el hongo fitopatogno Fusarium spp.

 

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2020 por los autores. Este artculo es de acceso abierto y distribuido segn los trminos y condiciones de la licencia Creative Commons Atribucin-NoComercial-CompartirIgual 4.0 Internacional (CC BY-NC-SA 4.0) (https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/).

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