Ciencias Tcnicas y Aplicadas

Artculo de Investigacin

 

Determinacin de Metales Pesados (Cadmio y Plomo) en el Calamar Gigante (Dosidicus Gigas) en la Ciudad de Manta, Ecuador

 

Determination of Heavy Metals (Cadmium and Lead) In the Giant Squid (Dosidicus Gigas) In the City Manta, Ecuador

 

Determinao de Metais Pesados ​​(Cdmio e Chumbo) na Lula Gigante (Dosidicus Gigas) na Cidade de Manta, Equador

 

 

 

Virginia Mercedes Salvatierra-Alfago I
virginia.salvatierra@pg.uleam.edu.ec https://orcid.org/0000-0001-9268-5980
 

 

 

 

 

 

 


Correspondencia: [email protected]

 

 

*Recibido: 20 de diciembre de 2021 *Aceptado: 18 de diciembre de 2021 * Publicado: 06 de enero de 2022

 

I.          Bioqumica en Actividades Pesqueras, Universidad Laica Eloy Alfaro de Manab, Manta, Ecuador.


II.   

Resumen

El mar acumula gran cantidad de contaminantes, entre estos los metales pesados como el plomo (Pb) y el cadmio (Cd) los cuales son absorbidos por las branquias y piel de los animales marinos. La presente investigacin busca determinar cuantitativamente los niveles de concentracin de los metales pesados como el Pb y Cd en el calamar gigante (Dosidicus gigas), especie altamente comercializada en la ciudad de Manta, evaluar si exceden el lmite permitido de 1,0 mg/kg normado por la legislacin de la Unin Europea de contaminantes qumicos en productos alimentarios y de 2,0 mg/kg por el INEN-CODEX 193:2013, adems de determinar el grado de absorbancia por granulometra de los metales. La muestra se recolect en los principales mercados de la ciudad de Manta (Los Esteros, Playita ma y Tarqui) durante cuatro semanas, con un total de veinticuatro muestras, las muestras fueron analizadas en el laboratorio de la Facultad de Agropecuaria de la Universidad Laica Eloy Alfaro de Manab. Se realizaron los procesos de secado en estufa, triturado y separacin por granulometra, a continuacin se realiz la digestin va seca y filtracin de la muestra, para posteriormente ser llevados al laboratorio de la EPAM donde se analiz mediante espectrofotometra de absorcin atmica en flama la determinacin de Pb y Cd, de los seis tratamientos realizados se obtuvo como resultado concentraciones de Cd de 0,02 a 0,11 en los mercados Los esteros y Playita Mia, respectivamente, para Pb valores de 0,13 a 0,45 mg/Kg en las muestras de los mercados Los Esteros y Tarqui fueron encontrados, respectivamente, se concluye que el calamar tiende acumular Cd y Pb sin exceder el lmite normado por el INEN-CODEX 193:2013 y la legislacin Europea, la granulometra no tiene efectos significativos en la concentracin de los metales analizados.

Palabras clave: Contaminacin metlica; cadmio (Cd); plomo (Pb); cefalpodos.

 

Abstract

The sea accumulates a large amount of contaminants, including heavy metals such as lead (Pb) and cadmium (Cd), which are absorbed by the gills and skin of marine animals. This research seeks to quantitatively determine the concentration levels of heavy metals such as Pb and Cd in giant squid (Dosidicus gigas), a species highly commercialized in the city of Manta, to evaluate if they exceed the permitted limit of 1.0 mg/kg regulated by the European Union legislation of chemical contaminants in food products and 2.0 mg/kg by INEN-CODEX 193:2013, in addition to determining the degree of absorbance by granulometry of metals. The sample was collected in the main markets of the city of Manta (Los Esteros, Playita ma and Tarqui) during four weeks, with a total of twenty-four samples, the samples were analyzed in the laboratory of the Faculty of Agriculture of the Universidad Laica Eloy Alfaro de Manab. The samples were dried in an oven, crushed and separated by granulometry, followed by dry digestion and filtration, and then taken to the EPAM laboratory where they were analyzed for Pb and Cd using flame atomic absorption spectrophotometry. Of the six treatments carried out, Cd concentrations of 0,02 to 0,11 were obtained in the Los Esteros and Playita Mia markets, respectively. 0,13 to 0,45 mg/kg in the samples from Los Esteros and Tarqui markets were found, respectively. It is concluded that squid tends to accumulate Cd and Pb without exceeding the limit established by INEN-CODEX 193:2013 and European legislation; particle size has no significant effect on the concentration of the metals analyzed.

Keywords: Metallic contamination; cadmium (Cd); lead (Pb); cephalopods.

 

Resumo

O mar acumula uma grande quantidade de poluentes, incluindo metais pesados ​​como chumbo (Pb) e cdmio (Cd), que so absorvidos pelas brnquias e pele dos animais marinhos. Esta pesquisa busca determinar quantitativamente os nveis de concentrao de metais pesados ​​como Pb e Cd na lula gigante (Dosidicus gigas), uma espcie altamente comercializada na cidade de Manta, para avaliar se eles ultrapassam o limite permitido de 1,0 mg/kg regulamentado pela legislao da Unio Europeia sobre poluentes qumicos em produtos alimentcios e 2,0 mg/kg pelo INEN-CODEX 193:2013, alm de determinar o grau de absorbncia por granulometria do metal. A amostra foi coletada nos principais mercados da cidade de Manta (Los Esteros, Playita ma e Tarqui) durante quatro semanas, com um total de vinte e quatro amostras, as amostras foram analisadas no laboratrio da Faculdade de Agricultura da Universidade Laica Eloy Alfaro de Manab. Foram realizados os processos de secagem em estufa, moagem e separao por granulometria, em seguida foi realizada a digesto a seco e filtrao da amostra, para posteriormente ser levada ao laboratrio da EPAM onde a determinao foi analisada por espectrofotometria de absoro atmica em chama. de Pb e Cd, dos seis tratamentos realizados, foram obtidas concentraes de Cd de 0,02 a 0,11 nos mercados Los esteros e Playita Mia, respectivamente, para valores de Pb de 0,13 a 0,45 mg/Kg Nas amostras dos mercados Los Foram encontrados Esteros e Tarqui, respectivamente, conclui-se que a lula tende a acumular Cd e Pb sem ultrapassar o limite regulamentado pelo INEN-CODEX 193:2013 e legislao europeia, a granulometria no apresenta efeitos significativos na concentrao dos metais analisados.

Palavras-chave: Contaminao metlica; cdmio (Cd); chumbo (Pb); cefalpodes.

 

Introduccin

La contaminacin por metales pesados como Cadmio (Cd) y el Plomo (Pb) ​​es un problema en los ecosistemas acuticos, estos metales se encuentran en los desechos slidos urbanos y en las industrias procesadoras de pescado, la pesca en Manta constituye uno de los motores de la actividad productiva y econmica (Lara 2017). La ciudad cuenta con una flota importante de embarcaciones, obteniendo empresas activas en el fragmento industrial pesquero (Ruperti, Zambrano, Fernndez, Lpez y Machuca, 2020). Manta se divide en parroquias urbanas y rurales y es en los mercados principales, Playita Mia, Tarqui y Los Esteros en donde se llev a cabo el muestreo para la presente investigacin, la contaminacin de la playa de la parroquia Los Esteros, afecta el sector pesquero desde hace algunas dcadas atrs (C. Gonzlez, 2016) (H. Gonzlez, 2016). Segn el informe del Instituto Nacional de Pesca INP (INP, 2020) indica que en Ecuador, las reas de pesca con mayor concentracin de calamar gigante se encuentran dispersas, siendo los principales puertos de desembarque de calamar gigante las provincias de Esmeraldas, Manab, y Santa Elena. De acuerdo con Uras et al. (2019) el Dosidicus gigas es una de las especies de calamar ms abundantes y grandes que se encuentran en la zona pelgica del Pacfico oriental, Segn investigaciones realizadas por Yu, Chen, y Zhang (2019) el calamar por su alto valor econmico sostiene importantes pesqueras frente a Per, Chile, Ecuador y el Golfo de California con capturas anuales por parte de China mnimas de 17.770 toneladas en 2001 y capturas mximas de 325.000 toneladas en 2014. La presente investigacin se enfoc en determinar la presencia de Cd y Pb en el calamar gigante (Dosidicus gigas) ya que estos son absorbidos a travs de las branquias o la piel de los organismos marinos (Lozano, Gutirrez, Hardisson, y G. Lozano, 2016). La absorcin de Pb es un riesgo de salud pblica; provoca retraso del desarrollo mental e intelectual en los nios y causa enfermedades cardiovasculares en adultos (Marn y Garca ,2017). El Pb no es necesario para el organismo humano, para ninguna funcin fisiolgica (Rodrguez, Cuellar, Maldonado y Suardiaz, 2016). Al ser ingerido en alimentos y bebidas contaminados ingresa por el sistema digestivo y una parte pasa a la sangre y otras partes del cuerpo (Piedad, et al., 2010). El Cd es relativamente raro en la naturaleza, la exposicin al Cd para la mayora de los seres vivos se da a travs de los alimentos y el agua (Marn y Garca, 2017). Las principales vas de entrada al organismo es la ingestin de alimentos contaminados como pescados, cereales y mariscos (Rodrguez 2017). Acorde a la ley de soberana alimentaria en Ecuador, es un objetivo estratgico y una obligacin garantizar alimentos sanos (Dvalos, 2016). El alimento que contenga algn txico para el consumo humano ser retirado inmediatamente segn La ley No. 544 Ley Orgnica de Defensa del Consumidor, por lo tanto, la Norma Tcnica Ecuatoriana NTE INEN-CODEX 193:2013 fijo lmite mximo permisible de 2,0 mg/kg para el Cd y no especifica valores para Pb en cefalpodos. La Unin Europea en el REGLAMENTO (CE) No 466/2001 DE LA COMISIN de 8 de marzo de 2001 por el que se fija el contenido mximo de determinados contaminantes en los productos alimenticios fijo las concentraciones mximas permisible de para Cd y Pb en 1,0 mg/kg sin viseras en el producto (Comisin Europea, 2005).

 

Materiales y Mtodos

Metodologa

Se us el diseo trifactorial con 6 tratamientos de acuerdo con mercados, granulometra y semanas de recoleccin (Tabla 1). Todas las muestras se realizaron por triplicado, para la comparacin de medias de los tratamientos se us la prueba Tukey al 0,05%. La muestras del manto del calamar gigante (Dosidicus gigas), fueron recolectas en la provincia de Manab cantn Manta, en tres mercados principales de la ciudad: Los Esteros, Tarqui y Playita Ma por 4 semanas con un total de 12 muestras, en el mes de febrero del 2021, en el proceso se separ por dos granulometras, obteniendo 24 muestras las cuales se triplico para obtener una interaccin de mercados, granulometras, semanas con un total de 72 muestras para determinar la concentracin de Cd y 72 muestras para determinar la concentracin de Pb de la biota del manto del calamar (Tabla 2).

 

 

 

 

Tabla 1. Esquema de factores de estudio

Elaborado por: Virginia Salvatierra

Mercados (factor A)

Granulometra (Factor B)

Semanas (Factor C)

Mercado de Tarqui

250 μm

4

Mercado de Tarqui

1180 μm

4

Mercado Los Esteros

250 μm

4

Mercado Los Esteros

1180 μm

4

Playita Mia

250 μm

4

Playita Mia

1180 μm

4

Total

 

 

 

 

Tabla 2. Esquema de Anlisis de la Varianza

Elaborado por: Virginia Salvatierra

Fuente de Variacin

 

 

Grado de libertad

Tratamientos

(t-1)

(6-1)

5

Repeticiones

(r-1)

(12-1)

11

Factor A

FA-1

(3-1)

2

Factor B

FB-1

(2-1)

1

Factor C

FC-1

(4-1)

3

Error experimental

(t-1) (r-1)

(6-1) (12-1)

55

total

(t*r)-1)

6 x12-1

71

 

 

 

Para determinar la presencia de metales pesados la investigacin se bas en mtodos oficiales, la digestin va seca de la muestra se realiz mediate el mtodo 3030 E. Digestin de cido ntrico (Baird, Eaton y Rice, 2017), para determinar Cd y Pb se utiliz espectroscopia de absorcin atmica con llama (Agilent Technologies 240FS AA, Serie 200 AA, con PSD 120 y GTA 120) se realiz mediante el mtodo de la AOAC Official Method 999.11. Los materiales de vidrios se lavaron con jabn neutro y enjuagados con agua destilada, se dejaron por 12 horas en una solucin de HNO3 al 10% para quitar todo tipo de impurezas y evitar contaminacin se colocaron en el esterilizador por 90 minutos.

Tratamiento de la muestra

Las muestras del manto del calamar fueron pesados a 100 gramos en la balanza carga superior, digital, capacidad 4000gr d=0.1, estas fueron colocadas en fundas de polietileno, se procedi a rotular con la fecha y se mantuvo en congelacin a -18 C: hasta la realizacin del anlisis para su posterior proceso se llev a la estufa de laboratorio marca ECOCELL/ LSIS-B2V/EC 22 donde se colocaron por 24 horas a 80C con la finalidad que las 24 muestras puedan ser trituradas con el mortero y separadas las dos granulometras por medio del tamiz # 60 equivalente a 250 micras (grano fino) y tamiz #16 equivalente a 1180 micras (grano grueso), el proceso de digestin va seca se realiz mediante el mtodo de 3030 E. (Baird et al., 2017), digestin de HNO3 el cual consisti en calentar la muestra colocada en un crisol a 200 C por 30 minutos en la plancha de calentamiento, para posteriormente llevar a mufla a temperatura de 525 C por 4 horas hasta la aparicin de cenizas blancas, se adicion al crisol 30 ml de HNO3 para digestion por 2 horas despus de lo cual se procede a filtrar en el papel filtro premium EISCO WHATMAN grade 1 de 11cm cdigo CH0390B, la muestra se almaceno en el tubo de ensayo hasta su anlisis (Baird et al., 2017).

Determinacin de metales

Mediante el mtodo obtenido de norma tcnica ecuatoriana INEN 2682:2013 se realiz la preparacin de la curva de calibracin para la espectrometra de absorcin atmica (INEN 2682, 2013, p.9). Se procedi con la configuracin y calibracin del equipo para minimizar errores en la lectura a travs de los estndares para Cd y Pb de acuerdo con los materiales de referencia de solucin acuosa certificados (certificate of analysis CPA-chem) Tabla 3.

 

Tabla 3. Referencia certificados certificate of analysis CPA-chem Plomo y Cadmio

Elaborado por: Virginia Salvatierra

Estndar

Marca

Material de Referencia

Concentracin

Matriz

Solucin patrn

Cadmio

CPA-chem

Solucin acuosa de Cd

1000 mg/l

2% HNO3

0,1 ml de nitrato de cadmio en 100 ml de agua bidestilada, posteriormente se toman 5 ml de solucin y se afora a 100 ml de agua bidestilada.

 

 

 

 

 

 

Plomo

CPA-chem

Solucin Acuosa de Pb

1000 mg/l

2% HNO3

0,1 ml de Nitrato de plomo en 100 ml de agua bidestilada, posteriormente se toman 5 ml de solucin y se afora a 100 ml de agua bidestilada.

 

Los parmetros de lectura del espectrofotmetro de absorcin atmica en flama Agilent Technologies 240FS AA (Serie 200 AA) con PSD 120 y GTA 120 el cual se encuentra en el Laboratorio de la EPAM se indican en la tabla 4.

 

Tabla 4. Parmetros de lectura del Equipo Agilent Technologies 240FS AA

Elaborado por: Virginia Salvatierra

Estndares de lectura

Cadmio

Plomo

Corriente de la lmpara

3 mA

12 mA

Longitud de onda

228,8nm

217,0 nm

Ganancia %

24%

25%

Tiempo de lectura

4 s

4 s

Sensibilidad

Alta

Alta

Tipo de gas o llama

Acetileno/aire

Acetileno

 

 

 

Resultados y Discusin

Niveles de concentracin de Cd entre 0,03 mg/kg a 0,11 mg/kg (Tabla 5), y de Pb entre 0,22 mg/kg a 0,42 mg/kg se han encontrado en las muestras analizadas (Tabla 6), el resultado de este estudio muestra que existe presencia de estos txicos aun en pequeas cantidades, las mismas que no exceden el lmite mximo permisible por la norma general para los contaminantes y toxinas presentes en los alimentos y piensos INEN 193:2013 de 2,0 mg/kg as como la legislacin europea en el REGLAMENTO (CE) No 466/2001 DE LA COMISIN de 8 de marzo de 2001 por el que se fija el contenido mximo de determinados contaminantes en los productos alimenticios de 1,0 mg/kg.

 

Tabla 5. Concentracin Cadmio por Mercado.

Elaborado por: Virginia Salvatierra

Medias con una letra comn no son significativamente diferentes (p > 0,05)

MERCADOS

Medias

n

E.E.

Playita Mia

0,11

8

0,01

A

Tarqui

0,04

8

0,01

B

Los Esteros

0,03

8

0,01

B

 

 

 

Tabla 6. Concentracin Plomo por Mercado.

Elaborado por: Virginia Salvatierra

Medias con una letra comn no son significativamente diferentes (p > 0,05)

MERCADOS

Medias

n

E.E.

Tarqui

0,42

8

0,02

A

Playita Mia

0,30

8

0,02

B

Los Esteros

0,22

8

0,02

C

 

 

 

Con respecto a la granulometra para analizar la cintica de absorcin de los metales se determin la presencia de Cd en la muestra de grano fino 250 m obteniendo como resultado 0,05 mg/kg, lo que muestra correlacin con el estudio realizado por Snchez et al. (2014) Al usar un menor tamao de partcula se obtiene una disminucin de la concentracin de Cd con respecto al Pb existe una tendencia en el grano grueso de 1180 μm a tener menor concentracin del metal de 0,29 mg/kg, de acuerdo a la investigacin realizada por Ale, Garca, Yipmantin, Guzmn, y Maldonado (2015), en su estudio de la cintica de biosorcin de Pb si se aumenta el tamao de partcula se producir una disminucin en la capacidad de adsorcin del metal. En las tablas 7 y 8 se muestran los resultados obtenidos.

 

Tabla 7. Concentracin de cadmio por granulometra.

Elaborado por: Virginia Salvatierra

Medias con una letra comn no son significativamente diferentes (p > 0,05)

GRANULOMETRIA

Medias

n

E.E.

1180 micras (grano grueso)

0,06

12

0,01

A

250 micras (grano fino)

0,05

12

0,01

A

 

 

 

Tabla 8. Concentracin de cadmio por granulometra.

Elaborado por: Virginia Salvatierra

Medias con una letra comn no son significativamente diferentes (p > 0,05)

GRANULOMETRIA

Medias

n

E.E.

250 micras (grano fino)

0,33

12

0,01

A

1180 micras (grano grueso)

0,29

12

0,01

A

Los resultados de la muestra por semana indican la presencia de Cd entre 0,04 mg/kg a 0,09 mg/kg (Tabla 9), y de Pb entre 0,28 mg/kg a 0,33 mg/kg (Tabla 10).

 

Tabla 9. Concentracin de Cd por semana.

Elaborado por: Virginia Salvatierra

Medias con una letra comn no son significativamente diferentes (p > 0,05)

SEMANA

Medias

n

E.E.

4

0,09

6

0,01

A

3

0,07

6

0,01

A

B

1

0,04

6

0,01

B

2

0,04

6

0,01

B

 

 

 

Tabla 10. Concentracin de Pb por semana.

Elaborado por: Virginia Salvatierra

Medias con una letra comn no son significativamente diferentes (p > 0,05)

SEMANA

Medias

n

E.E.

1

0,33

6

0,02

A

2

0,32

6

0,02

A

4

0,32

6

0,02

A

3

0,28

6

0,02

A

 

 

 

En el estudio realizado por Barriga y Aranda (2013) en las costas de Per se determin la concentracin de Cd entre 0,01 a 0,23 mg/kg y la presencia de Pb entre 0,07 a 0,23 mg/kg en la parte comestible fresca del calamar obteniendo niveles por debajo del contenido mximo permitido, existiendo correlacin con respecto a la investigacin realizada en la que se obtuvo niveles de concentracin para Cd entre 0,02 a 0,11 mg/kg (Tabla 11) y para Pb 0,13 a 0,45 mg/kg (Tabla 12).

 

Tabla 11. Concentracin de Cd en el calamar por tratamiento y repeticiones

Elaborado por: Virginia Salvatierra

Medias con una letra comn no son significativamente diferentes (p > 0,05)

MERCADOS

GRANULOMETRIA

(m)

Medias

n

E.E

Playita Mia

250 (grano fino)

0,11

4

0,06

A

Playita Mia

1180 (grano grueso)

0,11

4

0,06

A

Tarqui

1180 (grano grueso)

0,05

4

0,06

A

B

Los Esteros

1180 (grano grueso)

0,04

4

0,01

B

Tarqui

250 (grano fino)

0,03

4

0,06

B

Los Esteros

250 (grano fino)

0,02

4

0,01

B

 

 

 

Tabla 12. Concentracin de Pb en el calamar por tratamiento y repeticiones

Elaborado por: Virginia Salvatierra

Medias con una letra comn no son significativamente diferentes (p > 0,05)

MERCADOS

GRANULOMETRIA

(m)

Medias

n

E.E

Tarqui

1180 (grano grueso)

0,45

4

0,11

A

Tarqui

250 (grano fino)

0,39

4

0,11

A

B

Los Esteros

250 (grano fino)

0,32

4

0,03

B

Playita Mia

1180 (grano grueso)

0,3

4

0,11

B

Playita Mia

250 (grano fino)

0,29

4

0,11

B

Los Esteros

1180 (grano grueso)

0,13

4

0,03

C

 

 

Conclusiones

      El estudio demuestra que existe concentraciones de Pb y Cd en el calamar gigante (Dosidicus gigas) comercializado en los principales mercados de la ciudad de Manta, sin embargo, toxicolgicamente no representa un peligro para la salud de los consumidores ya que no excede los niveles permitidos por norma general para los contaminantes y toxinas presentes en los alimentos y piensos INEN 193:2013 y la legislacin Europea en el REGLAMENTO (CE) No 466/2001 DE LA COMISIN de 8 de marzo de 2001 por el que se fija el contenido mximo de determinados contaminantes en los productos alimenticios.

      El mercado en el que se encontr mayor concentracin de Cd cadmio en el calamar es Playita Mia y menor concentracin en el mercado de los Esteros, en el Pb la muestra con mayor concentracin fue el comercializado en el mercado de Tarqui y el de menor concentracin en el mercado los Esteros.

      La granulometra no es un factor que afecte directamente en las concentraciones de Pb y Cd ya que se us los mismos gramos para cada granulometra y no se tuvieron datos que se correlacionen entre s, pero si con otras investigaciones sobre la cintica de absorcin de estos metales de acuerdo con la granulometra.

Referencias

1.      AOAC International. (2019). Official methods of analysis of AOAC International 21 th Edition. Gaithersburg, Estados Unidos: AOAC INTERNATIONAL.

2.      Ale Borja, N., Garca Villegas, V., Yipmantin-Ojeda, A., Guzmn Lezama, E., y Maldonado Garca, H. (2015). Estudio de la cintica de biosorcin de plomo (II) en alga Ascophyllum nodosum. Revista de la Sociedad Qumica del Per, 81(3), 212-223.

3.      Aranda, D., y Barriga, M. (2013). Elementos esenciales, y metales pesados en seis especies de moluscos y una macroalga. Boletn Instituto Tecnolgico de la Produccin, 11, 66-72. Recuperado de https://repositorio.itp.gob.pe/bitstream/ITP/47/1/publicacion%2011.11.pdf

4.      Baird, R., Eaton, D., y Rice, W. (Ed). (2017). Mtodos estndar para el examen de agua y aguas residuales. Estados unidos. Washington, D.C: Editorial American Public Health Association.

5.      Comisin Europea. (2005, noviembre 29). CELEX1, Reglamento (CE) n 466/2001 de la Comisin de 8 de marzo de 2001 por el que se fija el contenido mximo de determinados contaminantes en los productos alimenticios (Texto pertinente a efectos del EEE). Retrieved June 21, 2021. Recuperado de https://op.europa.eu/es/publication-detail/-/publication/52b2484d-39e0-4aa9-ba19-4b13a887bb1c.

6.      Dvalos Quiroz, M. S. (2016). Acceso a lneas de crdito para el sector pesquero artesanal e industria del Cantn Manta, Ecuador en el ao 2016. Revista Universidad y Sociedad11(2), 116120. Recuperado de http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_abstract&pid=S2218-36202019000200116.

7.      Enrique Lozano Bilbao, ngel Jos Gutirrez, Hardisson, A., & Gonzalo Lozano Soldevilla. (2016, July). Contenido de metales pesados y elementos traza en especies de camarones de la isla de Tenerife. Retrieved June 21, 2021, Recuperado de https://www.researchgate.net/publication/312045861_CONTENIDO_DE_METALES_PESADOS_Y_ELEMENTOS_TRAZA_EN_ESPECIES_DE_CAMARONES_DE_LA_ISLA_DE_TENERIFE.

8.      Gonzlez Arteaga, C. E., & Gonzlez Arteaga, H. Y. (2016). Evaluacin qumica y microbiolgica de la playa de los esteros en la ciudad de Manta. La Granja23(1). Recuperado de https://doi.org/10.17163/lgr.n23.2016.05.

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10.  Instituto Ecuatoriano de Normalizacin. (2013). Norma Tcnica Ecuatoriana NTE INEN 2682:2013 Carne y productos crnicos. Mtodo para la determinacin de zinc, cobre, plomo, estao y arsnico por espectrometra de absorcin atmica. Recuperado de https://www.normalizacion.gob.ec/buzon/normas/2682.pdf.

11.  ‌Instituto Nacional de Pesca. (2020). Informe de Aspectos Biolgicos Pesquero Calamar Gigante. Recuperado de: Institutopesca.gob.ec website: http://www.institutopesca.gob.ec/calamar/.

12.  Jenni Sonia Ruperti-Caarte, Gema Elizabeth Zambrano-Ruperti, Fernndez-lava, V., Ronald Mauricio Lpez-Delgado, & Patricio Rafael Machuca-Mera. (2020). El emprendimiento y promocin de la actividad pesquera en el cantn Manta. Mikarimin. Revista Cientfica Multidisciplinaria. E-ISSN 2528-7842, 6(0), 2330. Recuperado de http://45.238.216.13/ojs/index.php/mikarimin/article/view/1932.

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